哈希分光光度計采用空間分隔雙光束、非對稱垂直式測量光路技術,相對傳統的雙光束技術而言,因光路簡捷使儀器的結構亦隨之簡化,可靠性大為提高。不僅光譜帶寬、波長精度符合包括藥典在內的各藥典的要求,更有為滿足采用相關法規進行控制的GLP/GMP程序控制功能。
它的基本原理是溶液中的物質在光的照射激發下,產生了對光的吸收效應,物質對光的吸收是選擇性的,各種不同的物質都具有其各自的吸收光譜,因此當某單色光通過溶液時,其能量就會被吸收而減弱,光能量減弱的程度和物質的濃度有一定的比例關系,即符合朗伯-比爾定律。
按照光源種類劃分,哈希分光光度計可分為以下幾類:
1、比例雙光束UV,測試過程全封閉,單光束光源通過光柵,再經棱鏡,分成2束UV,分別照射目標樣品與空白樣品,再合并光進入光電倍增管檢測器檢測,經差減法得到結果。目標樣品與空白樣品可以同時測量,測試靈敏度降低,全波段分析時間長。
2、傳統單光束UV紫外測試,測試過程全程封閉,單光束光源只通過光柵直接照射樣品,再經光電倍增管檢測器檢測。測試空白樣品之后才能測試目標樣品,全波段需要時間較長為2min;
3、全波段UV:樣品與空白樣品可以暴露在空氣中,照射樣品后,進入密閉箱,通過光柵,進入DAD檢測器檢測。檢測樣品不需要密閉,外界光線對測試無影響,使用方便準確且空白只需要檢測一次,全波段分析時間小于1s。
4、雙光束UV:與比例雙光束UV不同之處是通過棱鏡分出兩道光后,在分別通過光柵,各自分別進入光點倍增管檢測器檢測。加強了靈敏度,同時保留同時測量空白樣品與目標樣品的優點,全波段分析時間長。